课程简介
细胞是生物体生命活动结构和功能的基本单位。细胞生物学学作为生命科学的支柱学科之一，本身是一门实践性很强的学科。细胞生物学实验技术的发展为细胞生物学研究的持续深入提供了重要保证。细胞生物学实验是高等院校生物学教学体系中的主干课程之一，也是农林医学等相关专业的一门重要的专业课程。细胞生物学实验课程的学习，有利于促进学生了解细胞生物学领域的研究技术与方法，培养学生动手实践能力和逻辑思维能力，增强学生的分析问题与解决问题的能力，最终提升学生的综合素质。
本课程实验内容来源于学院本科生的优质实验课程及其长期教学积累。本课程着重从动植物细胞培养技术和应用方面设计系列实验项目，从动物细胞培养的无菌准备，细胞培养用液制备、原代培养技术到细胞传代、冻存、复苏技术，进而学习难度较大、无菌操作要求较高的动物细胞盖片单层培养技术，细胞骨架和细胞核染色观察技术，基于此进一步学习动物细胞转染、MTT法测定细胞生长曲线实验技术。最后你还可以学习到植物烟草BY-2细胞的培养技术，植物原生质体制备及瞬时转化实验技术。实验内容以解决问题为导向，注重多种实验技术与方法的综合应用。本课程的实验项目包括教师讲解、实验操作、虚拟仿真三部分。讲解部分着重从实验设计和技术应用层面介绍实验背景，有助于学生理解实验内容，培养学生科研思维能力；实验操作部分以微距近景的方式呈现完整的实验流程，使学生进一步理解实验设计，掌握操作细节；虚拟仿真项目让学生通过游戏闯关的方式完成实验过程，掌握实验技术与方法，解决学生无法通过在线视频进行实验操作的问题，提升在线实验课程的教学效果。
课程大纲
动物细胞培养的无菌准备及主要仪器设备的使用
1.1动物细胞培养的无菌准备（实验理论）
1.2动物细胞培养概述（实验理论）
1.3 细胞培养间清洁与消毒（实验操作）
1.4棉球和灯芯制作（实验操作）
1.5细胞培养用品清洗与灭菌（实验操作）
1.6物品包装及灭菌（实验操作）
1.7针头滤器过滤灭菌（实验操作）
1.8细胞培养基概述（实验理论）
1.9细胞培养用液的制备（实验理论）
1.10 细胞培养基配制和过滤（实验操作）
1.11主要仪器设备的虚拟操作
高压灭菌锅、超净工作台、移液器、天平和离心机等的主要仪器设备的虚拟操作训练
细胞原代培养
2.1细胞原代培养（实验理论）
2.2小鼠胚胎细胞原代培养--实验准备和胚胎分离（实验操作）
2.3小鼠胚胎细胞原代培养--组织块的分离与剪碎（实验操作）
2.4小鼠胚胎细胞原代培养--组织块的培养与观察（实验操作）
2.5鸡胚细胞原代培养--实验准备
2.6鸡胚细胞原代培养--鸡胚分离
2.7鸡胚细胞原代培养--组织块的分离与剪碎
2.8鸡胚细胞原代培养--组织块的培养与观察
2.9专题讲座t哺乳动物细胞模型简介（实验理论）
2.10专题讲座t细胞培养技术的应用（实验理论）
细胞传代
3.1 细胞传代（实验理论）
3.2细胞传代--DMEM完全培养基配制（实验操作）
3.3细胞传代--细胞消化（实验操作）
3.4细胞传代--分瓶培养（实验操作）
细胞冻存
4.1细胞冻存（实验理论）
4.2细胞冻存—冻存液配制（实验操作）
4.3细胞冻存--细胞消化（实验操作）
4.4细胞冻存—冻存细胞（实验操作）
细胞复苏与计数
5.1细胞复苏与计数（实验理论）
5.2细胞复苏与计数-完全培养基配制（实验操作）
5.3细胞复苏与计数-快速融化冻存细胞（实验操作）
5.4细胞复苏与计数-细胞计数（实验操作）
5.5细胞复苏与计数-复苏细胞培养（实验操作）
5.6 常见细胞污染的鉴别
动物细胞盖片单层培养技术
6.1动物细胞盖片单层培养（实验理论）
6.2 细胞爬片（实验操作）
细胞骨架和细胞核荧光观察
7.1 细胞骨架和细胞核荧光观察（实验理论）
7.2 细胞骨架和细胞核荧光观察实验相关溶液配置
实验操作视频1微丝骨架染料的溶解（实验操作）
实验操作视频2 PEM缓冲液配制（实验操作）
实验操作视频3 4%多聚甲醛溶液配制（实验操作）
实验操作视频4 0.5% triton X-100溶液配置（实验操作）
7.3 细胞骨架和细胞核荧光观察-细胞固定和通透（实验操作）
7.4 细胞骨架和细胞核荧光观察-细胞微丝和细胞核染色（实验操作）
7.5细胞骨架和细胞核荧光观察- 荧光显微镜观察细胞骨架及细胞核（实验操作）
动物细胞的转染与GFP的RNA干扰技术
8.1动物细胞的转染与GFP的RNA干扰技术（实验理论）
8.2细胞转染与RNA干扰相关试剂的准备（实验操作）
8.3 待转染质粒与脂质体混合（实验操作）
8.4转染细胞培养与观察（实验操作）
MTT法测定动物细胞生长曲线
9.1 MTT法测定细胞生长曲线（实验理论）
9.2 96孔板铺种细胞（实验操作）
9.3 细胞生长曲线测定（实验操作）
烟草BY-2细胞培养方法及应用
10.1烟草BY-2细胞培养方法及应用（实验理论）
10.2 BY-2细胞培养基的配制（实验操作）
10.3 BY-2细胞培养常用吸头装盒及灭菌（实验操作）
10.4 BY-2愈伤组织培养继代方法（实验操作）
10.5 BY-2细胞悬浮细胞培养继代方法（实验操作）
烟草BY-2细胞原生质体制备及瞬时转化
11.1烟草BY-2细胞原生质体制备及瞬时转化（实验理论）
11.2电击缓冲液的配制（实验操作）
11.3 原生质体培养基配制（实验操作）
11.4原生质体酶解液配制（实验操作）
11.5实验相关溶液的过滤除菌（实验操作）
11.6 原生质体的分离（实验操作）
11.7 电击转化（实验操作）
11.8 荧光显微镜观察实验结果（实验操作）
拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化
12.1 拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化（实验理论）
12.2拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化（实验操作）
细胞生物学实验技术及其应用
13.1 荧光显微镜技术的概述
13.2 拟南芥杂交技术 （实验操作）
1.1动物细胞培养的无菌准备（实验理论）
1.2动物细胞培养概述（实验理论）
1.3 细胞培养间清洁与消毒（实验操作）
1.4棉球和灯芯制作（实验操作）
1.5细胞培养用品清洗与灭菌（实验操作）
1.6物品包装及灭菌（实验操作）
1.7针头滤器过滤灭菌（实验操作）
1.8细胞培养基概述（实验理论）
1.9细胞培养用液的制备（实验理论）
1.10 细胞培养基配制和过滤（实验操作）
1.11主要仪器设备的虚拟操作
高压灭菌锅、超净工作台、移液器、天平和离心机等的主要仪器设备的虚拟操作训练
细胞原代培养
2.1细胞原代培养（实验理论）
2.2小鼠胚胎细胞原代培养--实验准备和胚胎分离（实验操作）
2.3小鼠胚胎细胞原代培养--组织块的分离与剪碎（实验操作）
2.4小鼠胚胎细胞原代培养--组织块的培养与观察（实验操作）
2.5鸡胚细胞原代培养--实验准备
2.6鸡胚细胞原代培养--鸡胚分离
2.7鸡胚细胞原代培养--组织块的分离与剪碎
2.8鸡胚细胞原代培养--组织块的培养与观察
2.9专题讲座t哺乳动物细胞模型简介（实验理论）
2.10专题讲座t细胞培养技术的应用（实验理论）
细胞传代
3.1 细胞传代（实验理论）
3.2细胞传代--DMEM完全培养基配制（实验操作）
3.3细胞传代--细胞消化（实验操作）
3.4细胞传代--分瓶培养（实验操作）
细胞冻存
4.1细胞冻存（实验理论）
4.2细胞冻存—冻存液配制（实验操作）
4.3细胞冻存--细胞消化（实验操作）
4.4细胞冻存—冻存细胞（实验操作）
细胞复苏与计数
5.1细胞复苏与计数（实验理论）
5.2细胞复苏与计数-完全培养基配制（实验操作）
5.3细胞复苏与计数-快速融化冻存细胞（实验操作）
5.4细胞复苏与计数-细胞计数（实验操作）
5.5细胞复苏与计数-复苏细胞培养（实验操作）
5.6 常见细胞污染的鉴别
动物细胞盖片单层培养技术
6.1动物细胞盖片单层培养（实验理论）
6.2 细胞爬片（实验操作）
细胞骨架和细胞核荧光观察
7.1 细胞骨架和细胞核荧光观察（实验理论）
7.2 细胞骨架和细胞核荧光观察实验相关溶液配置
实验操作视频1微丝骨架染料的溶解（实验操作）
实验操作视频2 PEM缓冲液配制（实验操作）
实验操作视频3 4%多聚甲醛溶液配制（实验操作）
实验操作视频4 0.5% triton X-100溶液配置（实验操作）
7.3 细胞骨架和细胞核荧光观察-细胞固定和通透（实验操作）
7.4 细胞骨架和细胞核荧光观察-细胞微丝和细胞核染色（实验操作）
7.5细胞骨架和细胞核荧光观察- 荧光显微镜观察细胞骨架及细胞核（实验操作）
动物细胞的转染与GFP的RNA干扰技术
8.1动物细胞的转染与GFP的RNA干扰技术（实验理论）
8.2细胞转染与RNA干扰相关试剂的准备（实验操作）
8.3 待转染质粒与脂质体混合（实验操作）
8.4转染细胞培养与观察（实验操作）
MTT法测定动物细胞生长曲线
9.1 MTT法测定细胞生长曲线（实验理论）
9.2 96孔板铺种细胞（实验操作）
9.3 细胞生长曲线测定（实验操作）
烟草BY-2细胞培养方法及应用
10.1烟草BY-2细胞培养方法及应用（实验理论）
10.2 BY-2细胞培养基的配制（实验操作）
10.3 BY-2细胞培养常用吸头装盒及灭菌（实验操作）
10.4 BY-2愈伤组织培养继代方法（实验操作）
10.5 BY-2细胞悬浮细胞培养继代方法（实验操作）
烟草BY-2细胞原生质体制备及瞬时转化
11.1烟草BY-2细胞原生质体制备及瞬时转化（实验理论）
11.2电击缓冲液的配制（实验操作）
11.3 原生质体培养基配制（实验操作）
11.4原生质体酶解液配制（实验操作）
11.5实验相关溶液的过滤除菌（实验操作）
11.6 原生质体的分离（实验操作）
11.7 电击转化（实验操作）
11.8 荧光显微镜观察实验结果（实验操作）
拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化
12.1 拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化（实验理论）
12.2拟南芥叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化（实验操作）
细胞生物学实验技术及其应用
13.1 荧光显微镜技术的概述
13.2 拟南芥杂交技术 （实验操作）
关
注
我
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